Logo el.boatexistence.com

Μπορείτε να εκλούσετε πρωτεΐνη;

Πίνακας περιεχομένων:

Μπορείτε να εκλούσετε πρωτεΐνη;
Μπορείτε να εκλούσετε πρωτεΐνη;

Βίντεο: Μπορείτε να εκλούσετε πρωτεΐνη;

Βίντεο: Μπορείτε να εκλούσετε πρωτεΐνη;
Βίντεο: Workadu Tips 👉 Πώς να εκδώσετε παραστατικά! 2024, Ιούλιος
Anonim

Εάν η πρωτεΐνη σας δεν έχει το ίδιο μέγεθος με το αντίσωμά σας, μπορείτε να εκλούσετε με 0,1M γλυκίνη, pH2-3 και στη συνέχεια να διαχωρίσετε την πρωτεΐνη που σας ενδιαφέρει από το αντίσωμα χρησιμοποιώντας SEC (όπως το superdex 200).

Τι είναι η έκλουση πρωτεΐνης;

Οι πρωτεΐνες εκλούονται με μια βαθμίδα αυξανόμενων ποσοτήτων ενός οργανικού διαλύτη, όπως το ακετονιτρίλιο. Οι πρωτεΐνες εκλούονται ανάλογα με την υδροφοβικότητά τους. Μετά τον καθαρισμό με HPLC η πρωτεΐνη βρίσκεται σε διάλυμα που περιέχει μόνο πτητικές ενώσεις και μπορεί εύκολα να λυοφιλοποιηθεί.

Γιατί οι πρωτεΐνες έχουν χαμηλό pH έκλουση;

Η χρήση ρυθμιστικού διαλύματος χαμηλού pH για έκλουση από την πρωτεΐνη Α είναι γνωστό ότι συμβάλλει στη συσσώρευση προϊόντος Ωστόσο, ένα πιο περιορισμένο σύνολο στοιχείων υποδηλώνει ότι το χαμηλό pH μπορεί να μην είναι το μοναδικό αιτία της συσσωμάτωσης στην πρωτεΐνη Α χρωματογραφία, μάλλον, άλλες πτυχές της διαδικασίας μπορεί να συμβάλει σημαντικά.

Πώς γίνεται η έκλουση;

Στην αναλυτική και οργανική χημεία, η έκλουση είναι η διαδικασία εξαγωγής ενός υλικού από ένα άλλο με πλύσιμο με διαλύτη; όπως στο πλύσιμο των φορτωμένων ρητινών ανταλλαγής ιόντων για την απομάκρυνση των δεσμευμένων ιόντων. … Αφού τα μόρια του διαλύτη εκτοπίσουν την αναλυόμενη ουσία, η αναλυόμενη ουσία μπορεί να μεταφερθεί από τη στήλη για ανάλυση.

Πόσα αντισώματα χρειάζεστε για το Coip;

Για πειράματα ρουτίνας Co-IP, το αντίσωμα που χρησιμοποίησα είναι όχι περισσότερο από 2ug (Στο σετ μου, 1,4 -2,0 ug αντισώματος επαρκούν για τη σύλληψη 2500-5000 ug προϊόν λύσης πρωτεΐνης.) Αλλά εξακολουθεί να εξαρτάται από τα επίπεδα έκφρασης των πρωτεϊνών-στόχων στα δείγματά σας, επομένως μάλλον πρέπει να κάνετε κάποιες τροποποιήσεις.

How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg

How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg
How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg
Βρέθηκαν 33 σχετικές ερωτήσεις

Συνιστάται: