Σχηματίστηκαν σφαιροειδή χρησιμοποιώντας πολύ γνωστή μέθοδος κρεμάμενης σταγόνας Τα συλλεχθέντα κύτταρα αιωρήθηκαν σε μέσα ανάπτυξης σε συγκέντρωση 5.000 κυττάρων/20 μl. Σταγόνες παρασκευασμένου κυτταρικού διαλύματος (20 μl/σταγόνα) διαμορφώθηκαν στη συνέχεια σε ένα καπάκι πλάκας ιστοκαλλιέργειας 60 mm και επωάστηκαν για 2 ημέρες για να σχηματιστούν σφαιροειδή.
Πώς δημιουργούνται τα σφαιροειδή;
Τα σφαιροειδή μπορούν να αναπτυχθούν με μερικές διαφορετικές μεθόδους. Μια κοινή μέθοδος είναι η χρήση πλακών χαμηλής προσκόλλησης κυττάρων, συνήθως πλάκας 96 φρεατίων, για τη μαζική παραγωγή σφαιροειδών καλλιεργειών, όπου τα συσσωματώματα σχηματίζονται στον στρογγυλεμένο πυθμένα των πλακών κυττάρων.
Τι είναι τα κυτταρικά σφαιροειδή;
Σφαιροειδή, οι τρισδιάστατες (3D) κυτταρικές καλλιέργειες που διατάσσονται κατά τη διάρκεια του πολλαπλασιασμού σε σχηματισμούς που μοιάζουν με σφαίρες, πήραν το όνομά τους τη δεκαετία του 1970, όταν οι επιστήμονες παρατήρησαν αυτόν τον πνεύμονα χάμστερ κύτταρα που αναπτύχθηκαν σε εναιώρημα τακτοποιήθηκαν σε μια σχεδόν τέλεια σφαιρική μορφή.
Πώς μετράτε τα σφαιροειδή;
Ανάλογα, ο όγκος των σφαιροειδών μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως μέτρο της αποτελεσματικότητας για in vitro μελέτες φαρμάκων για τον καρκίνο. Ο όγκος σφαιροειδών ( V=0,5ΜήκοςΠλάτος2 ) προσδιορίζεται με βάση το κύριο και το μικρότερο αξονικό μήκος (κοινώς γνωστό ως μήκος και πλάτος) των σφαιροειδών6, 7
Πόσα κύτταρα υπάρχουν σε ένα σφαιροειδές;
Εικ. 10. Προσομοίωση υπολογιστή της επιβίωσης των σφαιροειδών που αρχικά αποτελούνταν από 5 × 104 κύτταρα και ακτινοβολήθηκαν σύμφωνα με διαφορετικά σχήματα κλασμάτωσης.
