Πώς πέπτεται το DNA από ένζυμα περιοριστικής ενδονουκλεάσης;

Πώς πέπτεται το DNA από ένζυμα περιοριστικής ενδονουκλεάσης;
Πώς πέπτεται το DNA από ένζυμα περιοριστικής ενδονουκλεάσης;
Anonim

Η πέψη περιορισμού επιτυγχάνεται με επώαση του μορίου DNA στόχου με περιοριστικά ένζυμα - ένζυμα που αναγνωρίζουν και δεσμεύουν συγκεκριμένες αλληλουχίες DNA και διασπώνται σε συγκεκριμένα νουκλεοτίδια είτε εντός της αλληλουχίας αναγνώρισης είτε εκτός της ακολουθίας αναγνώρισης.

Πώς χωνεύονται τα περιοριστικά ένζυμα;

Πρωτόκολλο Πέψης Περιορισμού Ενζύμου

  1. Προσθέστε εξαρτήματα σε ένα καθαρό σωλήνα με τη σειρά που φαίνεται: …
  2. Επωάστε την αντίδραση σε θερμοκρασία πέψης (συνήθως 37 °C) για 1 ώρα.
  3. Διακοπή της πέψης με απενεργοποίηση θερμότητας (65 °C για 15 λεπτά) ή προσθήκη 10 mM τελικής συγκέντρωσης EDTA.

Το ένζυμο περιορισμού αφομοιώνει το DNA;

Τα ένζυμα περιορισμού μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν για τη δημιουργία συμβατών άκρων σε προϊόντα PCR. … Σε όλες τις περιπτώσεις, ένα ή περισσότερα περιοριστικά ένζυμα χρησιμοποιούνται για την πέψη του DNA με αποτέλεσμα είτε σε μη κατευθυντική είτε κατευθυντική εισαγωγή στο συμβατό πλασμίδιο.

Πώς λειτουργούν τα περιοριστικά ένζυμα DNA;

Πώς λειτουργούν τα ένζυμα περιορισμού; Όπως όλα τα ένζυμα, ένα ένζυμο περιορισμού λειτουργεί με αντιστοίχιση σχήματος προς σχήμα Όταν έρχεται σε επαφή με μια αλληλουχία DNA με σχήμα που ταιριάζει με ένα μέρος του ενζύμου, που ονομάζεται θέση αναγνώρισης, τυλίγεται γύρω από το DNA και προκαλεί σπάσιμο και στους δύο κλώνους του μορίου του DNA.

Ποιο ένζυμο χωνεύει το DNA;

Αυτά τα ένζυμα ονομάζονται ενδονουκλεάσες περιορισμού ή ένζυμα περιορισμού και είναι σε θέση να διασπούν μόρια DNA στις θέσεις στις οποίες υπάρχουν συγκεκριμένες μικρές αλληλουχίες βάσεων.

Συνιστάται: