Πίνακας περιεχομένων:
- Ακολουθεί μια επισκόπηση των διαφορετικών βημάτων ενός πρωτοκόλλου έμμεσης χρώσης ανοσοφθορισμού
- Πώς εκτελείτε τον ανοσοφθορισμό;
- Πώς χρησιμοποιείτε τον ανοσοφθορισμό σε ένα κύτταρο;
- Τι είναι ένα παράδειγμα ανοσοφθορισμού;
- Ποια είναι η χρήση της χρώσης με ανοσοφθορισμό;
Βίντεο: Πώς να κάνετε ανοσοφθορισμό;
2024 Συγγραφέας: Fiona Howard | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2024-01-10 06:35
Ακολουθεί μια επισκόπηση των διαφορετικών βημάτων ενός πρωτοκόλλου έμμεσης χρώσης ανοσοφθορισμού
- Σχεδιασμός πειράματος και προετοιμασία δειγμάτων. …
- Στερέωση δείγματος. …
- Διαπερατότητα κυττάρων. …
- Αποκλεισμός. …
- Πρωτογενής Επώαση Αντισωμάτων. …
- Δευτερογενής Επώαση Αντισωμάτων. …
- Counterstain and Mounting.
Πώς εκτελείτε τον ανοσοφθορισμό;
Όλα τα βήματα επώασης πραγματοποιούνται σε θερμοκρασία δωματίου
- Πλύντε τα κελιά δύο φορές και χρησιμοποιήστε τσιμπιδάκια για να τοποθετήσετε προσεκτικά την καλυπτρίδα με τα αναποδογυρισμένα κελιά στον υγροποιημένο θάλαμο.
- Στερεώστε με φορμαλδεΰδη 4 % για 10 λεπτά και πλύνετε 3 ×.
- Διαπερατότητα με 0,1 % TX-100/PBS για 15–20 λεπτά και πλύσιμο 3 ×.
Πώς χρησιμοποιείτε τον ανοσοφθορισμό σε ένα κύτταρο;
Πρωτόκολλο ανοσοφθορισμού για προσκολλημένα κύτταρα
- Σπόρος 1–1,5 x104 κύτταρα ανά φρεάτιο αντικειμενοφόρου πλάκας 4 θαλάμων σε 500 mL μέσου καλλιέργειας. Επώαση στους 37°C σε 5% CO2.
- 32–36 ώρες μετά τη σπορά των κυττάρων, αφαιρέστε το μέσο κυτταροκαλλιέργειας και ξεπλύνετε τα κύτταρα 3 φορές χρησιμοποιώντας 500 µL 1X PBS.
Τι είναι ένα παράδειγμα ανοσοφθορισμού;
Για παράδειγμα, ένας ερευνητής μπορεί να δημιουργήσει πρωτεύοντα αντισώματα σε μια κατσίκα που αναγνωρίζουν πολλά αντιγόνα και στη συνέχεια να χρησιμοποιήσει δευτερεύοντα αντισώματα κουνελιού συζευγμένα με βαφή που αναγνωρίζουν τη σταθερή περιοχή αντισώματος κατσίκας ( αντισώματα κουνελιού κατά της κατσίκας).
Ποια είναι η χρήση της χρώσης με ανοσοφθορισμό;
Η χρώση ανοσοφθορισμού (IF) είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη τεχνική στη βιολογική έρευνα και στην κλινική διάγνωση Η IF χρησιμοποιεί σημασμένα με φθορισμό αντισώματα για την ανίχνευση συγκεκριμένων αντιγόνων-στόχων. Ακολουθούμενη από απεικόνιση, είναι μια πολύ άμεση τεχνική καθώς μπορείτε να δείτε πραγματικά κάτι.
Συνιστάται:
Θα προτιμούσατε να κάνετε ή να κάνετε;
Χρησιμοποιούμε θα προτιμώ ή θα προτιμούσα, ακολουθούμενο από ένα αόριστο ή ένα ουσιαστικό, για να μιλήσουμε για παρούσες και μελλοντικές προτιμήσεις: Θα προτιμούσα να πάω μόνος μου . Θα προτιμούσατε να κάνετε νόημα; Και τα δύο "
Πρέπει να κάνετε roll out πριν κάνετε διατάσεις;
Χρησιμοποιήστε τον αφρό σας αμέσως μετά την προπόνησή σας - πριν από τις διατάσεις. Φροντίστε να κάνετε ρολό αφρού τις μυϊκές ομάδες που χρησιμοποιήσατε κατά τη διάρκεια της προπόνησής σας, καθώς και αυτές πάνω και κάτω από αυτές τις μυϊκές ομάδες.
Κάνετε τέντωμα πριν κάνετε προθέρμανση;
Είναι πολύ σημαντικό να κάνετε τη γενική προθέρμανση πριν κάνετε διατάσεις Δεν είναι καλή ιδέα να επιχειρήσετε να κάνετε διατάσεις πριν ζεσταθούν οι μύες σας (κάτι που η γενική η προθέρμανση επιτυγχάνεται). Η προθέρμανση μπορεί να κάνει περισσότερα από το να χαλαρώσει απλώς τους δύσκαμπτους μύες.
Κάνετε και δεν πρέπει να κάνετε μια συνέντευξη;
Τα πρέπει και τα μη της διεξαγωγής μιας συνέντευξης για δουλειά DO: δημιουργήστε άνετο περιβάλλον συνέντευξης. … DO: συγκεντρώστε πληροφορίες σχετικά με την κενή θέση. … DO: πουλήστε τη θέση και την εταιρεία σας. … DO: προετοιμαστείτε για τη συνέντευξη.
Πώς να μειώσετε τη χρώση φόντου στον ανοσοφθορισμό;
Για να μειωθεί η μη ειδική δέσμευση αντισωμάτων και, κατά συνέπεια, να μειωθεί το σήμα υποβάθρου, συνιστάται χρησιμοποιήστε ένα διάλυμα αποκλεισμού πριν από την επώαση με αντισώματα Το πιο αποτελεσματικό διάλυμα αποκλεισμού θα είναι αυτός που περιέχει ορό από το ίδιο είδος στο οποίο αναπτύχθηκε το δευτερεύον αντίσωμα .
