Οι αμφολύτες χρησιμοποιούνται για να σχηματίσουν μια βαθμίδα pH εντός του τριχοειδούς και οι πρωτεΐνες που πρόκειται να διαχωριστούν μεταναστεύουν (ή εστιάζονται) μέσω του αμφολυτικού μέσου μέχρι να αφορτιστούν στο pI τους τιμές.
Γιατί χρησιμοποιούνται αμφολύτες στο IEF;
Στο IEF, οι αμφολύτες ταξιδεύουν σύμφωνα με το φορτίο τους υπό την επίδραση ηλεκτρικού πεδίου, παρουσία βαθμίδωσης pH, έως ότου το καθαρό φορτίο του μορίου μηδενιστεί (π.χ. ισοηλεκτρικό σημείο, pI). … Ακόμη και οι απλούστεροι αμφολύτες (π.χ. αμινοξέα) μπορούν να δημιουργήσουν μια βαθμίδα pH και να λειτουργήσουν ως ισοηλεκτρικό ρυθμιστικό διάλυμα.
Γιατί είναι σημαντικό το ισοηλεκτρικό σημείο;
Το ισοηλεκτρικό σημείο είναι σημαντικό στον καθαρισμό πρωτεΐνης επειδή το αντιπροσωπεύει το pH όπου η διαλυτότητα είναι τυπικά ελάχιστη. … Αυτό το πολυμερές έχει μοναδικές ιδιότητες για να διασφαλίζει ότι οι πρωτεΐνες σχηματίζουν μια βαθμίδα pH όταν εφαρμόζετε ένα ηλεκτρικό πεδίο σε όλο το διάλυμα.
Πώς οι αμφολύτες δημιουργούν βαθμίδα pH;
Στο CIEF, δημιουργείται μια ετερογενής διαβάθμιση pH μέσα στο τριχοειδές με εφαρμογή τάσης στους αμφολύτες-φορείς Το εύρος της βαθμίδας pH εξαρτάται από τη σειρά αμφολυτών που επιλέγεται. Οι αμφολύτες διατίθενται στο εμπόριο για να καλύπτουν τόσο ευρεία όσο και στενά εύρη pH, όπως φαίνεται στην Εικόνα 5.2.
Τι είναι η χημεία αμφολυτών;
Οι αμφολύτες είναι ενώσεις που όταν διαλύονται σε νερό (το οποίο είναι αμφοτερική ένωση) μπορούν να δράσουν είτε ως οξύ είτε ως βάση.
