Κατά την απόψυξη ζωικών κυττάρων πρέπει;

2024 Συγγραφέας: Fiona Howard | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2024-01-10 06:36

Οδηγίες για την απόψυξη κυττάρων

1. Αποψύξτε τα κατεψυγμένα κύτταρα γρήγορα (< 1 λεπτό) σε υδατόλουτρο 37°C.
2. Αραιώνετε τα αποψυγμένα κύτταρα αργά προτού τα επωάσετε, χρησιμοποιώντας προθερμασμένο μέσο ανάπτυξης.
3. Τα αποψυγμένα κύτταρα σε πλάκα σε υψηλή πυκνότητα για βελτιστοποίηση της ανάκτησης.
4. Χρησιμοποιείτε πάντα την κατάλληλη ασηπτική τεχνική και εργάζεστε σε απορροφητήρα στρωτής ροής.

Γιατί γίνεται η απόψυξη των κυττάρων;

Είναι ζωτικής σημασίας η σωστή απόψυξη των κυττάρων προκειμένου να διατηρηθεί η βιωσιμότητα της η καλλιέργεια και να μπορέσει η καλλιέργεια να ανακάμψει πιο γρήγορα. Ορισμένα κρυοπροστατευτικά, όπως το DMSO, είναι τοξικά πάνω από 4 °C. Επομένως, είναι σημαντικό οι καλλιέργειες να αποψύχονται γρήγορα και να αραιώνονται σε μέσο καλλιέργειας για να ελαχιστοποιηθούν οι τοξικές επιδράσεις.

Ποια είναι η διαδικασία απόψυξης;

Η απόψυξη είναι η διαδικασία λήψης ενός κατεψυγμένου προϊόντος από κατεψυγμένο σε θερμοκρασία (συνήθως πάνω από 0°C) όπου δεν υπάρχει υπόλοιπο πάγου, δηλαδή «απόψυξη». Η απόψυξη θεωρείται συχνά ως απλώς η αντιστροφή της διαδικασίας κατάψυξης.

Ποιος είναι ο καλύτερος τρόπος για να παγώσετε κύτταρα;

Παγώστε τα κύτταρα αργά μειώνοντας τη θερμοκρασία περίπου κατά 1°C ανά λεπτό χρησιμοποιώντας έναν κρυοκαταψύκτη ελεγχόμενου ρυθμού ή ένα δοχείο κρυοκατάψυξης όπως το Mr. Frosty», διατίθεται από την Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Χρησιμοποιείτε πάντα το προτεινόμενο μέσο κατάψυξης.

Πώς αποψύχετε ένα πρωτεύον κύτταρο;

Σκουπίστε το εξωτερικό του φιαλιδίου των κυττάρων με 70% αιθανόλη ή ισοπροπανόλη. Σε ένα ντουλάπι βιοασφάλειας, στρίψτε το καπάκι κατά ένα τέταρτο για να εκτονώσετε την εσωτερική πίεση και μετά ξανασφίξτε. Ξεπαγώστε γρήγορα τα κύτταρα σε υδατόλουτρο 37°C περιστρέφοντας απαλά το φιαλίδιο. Αφαιρέστε το φιαλίδιο όταν παραμείνει μικρή ποσότητα πάγου.