Η ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης χρησιμοποιείται συνήθως για τον διαχωρισμό θραυσμάτων DNA μετά από περιορισμό πέψη ενδονουκλεάσης ή ενίσχυση PCR. Τα θραύσματα ανιχνεύονται με χρώση της γέλης με την παρεμβαλλόμενη χρωστική, βρωμιούχο αιθίδιο, που ακολουθείται από οπτικοποίηση/φωτογράφηση υπό υπεριώδες φως.
Πώς χρησιμοποιείτε το τζελ αγαρόζης στην ηλεκτροφόρηση;
1. Προετοιμασία του Gel
- Ζυγίστε την κατάλληλη μάζα αγαρόζης σε φιάλη Erlenmeyer. Τα πηκτώματα αγαρόζης παρασκευάζονται χρησιμοποιώντας ένα επί τοις εκατό διάλυμα w/v. …
- Προσθέστε τρεχούμενο ρυθμιστικό διάλυμα στη φιάλη που περιέχει αγαρόζη. Ανακατέψτε για να αναμειχθεί. …
- Λιώστε το μείγμα αγαρόζης/ρυθμιστικού διαλύματος. …
- Προσθέστε βρωμιούχο αιθίδιο (EtBr) σε συγκέντρωση 0,5 μg/ml.
Πώς χρησιμοποιείτε την ηλεκτροφόρηση γέλης;
Βασικά σημεία:
- Η ηλεκτροφόρηση γέλης είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό θραυσμάτων DNA ανάλογα με το μέγεθός τους.
- Δείγματα DNA φορτώνονται σε φρεάτια (εσοχές) στο ένα άκρο ενός τζελ και εφαρμόζεται ηλεκτρικό ρεύμα για να τα τραβήξει μέσα από το τζελ.
- Τα θραύσματα DNA είναι αρνητικά φορτισμένα, επομένως κινούνται προς το θετικό ηλεκτρόδιο.
Ποια είναι η κύρια λειτουργία της ηλεκτροφόρησης γέλης;
Η ηλεκτροφόρηση γέλης είναι μια εργαστηριακή μέθοδος που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό μιγμάτων DNA, RNA ή πρωτεϊνών σύμφωνα με το μοριακό μέγεθος.
Σε τι χρησιμοποιείται η ηλεκτροφόρηση;
Η
Η ηλεκτροφόρηση είναι μια εργαστηριακή τεχνική που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό μορίων DNA, RNA ή πρωτεΐνης με βάση το μέγεθος και το ηλεκτρικό τους φορτίο. Ένα ηλεκτρικό ρεύμα χρησιμοποιείται για τη μετακίνηση μορίων που πρόκειται να διαχωριστούν μέσω ενός τζελ.
